Zamrzavanje embriona za eko

Moderni razvoj medicinske tehnologije doprinosi razvoju novih pristupa liječenju neplodnosti. Tako široko koristi u kliničkoj praksi, dobio sam jedan od načina podrške reproduktivnih tehnologija - krioprezervacije sperme, embrija, jajnih ćelija. U ovom članku ćemo pogledati na nove moderne svojevrsna priprema za oplodnju embriona ili sperme putem duboko smrznute tečnim azotom.

Video: Zamrzavanje embriona

Ova metoda u određenoj mjeri doprinosi rješavanju problema očuvanja i buduću upotrebu biološkog materijala, koji ne koristi tijekom in vitro oplodnje ciklusa. Zaista, na niskim temperaturama, embrioni se čuvaju u održiva država nije prekršila svoje metaboličke aktivnosti i efikasnosti, to je implantacija nivo ne zaostaje in vitro programa oplodnje koristeći svježe uzoraka biomaterijala.

U svijetu medicinske prakse, nagomilao značajno iskustvo u postizanju trudnoće odmrzavanje i oplodnja zrelih oocita. Do nedavno se koristi kao cryoprotectant reagensa dimethylsulfoxide (DMSO) i krug sporog hlađenja i brzog odmrzavanja. Nakon toga čelika primjenjuju diol (PROH), a zatim - kombinacija diol i saharozu, koja se pretvorila u prvi komercijalni kit za oocita zamrzavanje i odmrzavanje.

Problemi ćelija zamrzavanje

U isto vrijeme, mobilni zamrzavanje tehnologija još uvijek nije dovoljno razvijena, a time i njegovo poboljšanje je hitan problem koji zahtijeva daljnje odluke. Poteškoće krioprezervaciju ćelija zrele jaja su povezani:

• uz značajan iznos svojih citoplazmi;
• visok sadržaj vode u ćeliji;
• stanje hromozoma u metafazi mejoze su vrlo osjetljive na temperaturu i osmotski vibracije zamrzavanjem, i (vrlo važno) odmrzavanja.

Glavni uzrok oštećenja ćelija tijekom smrzavanja i odmrzavanja je formiranje ledenih kristala unutar ćelije. Čini se da ćelije dehidracija može riješiti ovaj problem, ali uklanjanje previše vode se takođe smatra destruktivnom ćelija.

Video: Zamrzavanje embriona: zašto je ovaj postupak

Poznato je da tačke smrzavanja vode, koja sadrži različite ione ispod 0 ° C i ovisi o njihovoj koncentraciji. U krioprezervacije ćelije izložen dio molekula vode kristalizacije koji povećava koncentraciju i na taj način smanjuje temperaturu smrzavanja.

Porast u ćeliji nivou osmotski pritisak također ima razarajući učinak. Danas nedvosmisleno dokazano da je faktor oštećenja ćelija nije niske temperature, a kristali leda formiraju u termalnoj zoni definisane smrzavanja i odmrzavanja.

Ono što je proces zamrzavanja ćelije koristeći cryotechnology?

Proces smrznute materijal se javlja uglavnom na dva načina:

1. Sporo način krioprezervacije.
2. Neuravnotežen način krioprezervacije, koji se sastoji od ultrabrzog krioprezervacije i ostakljivanje.

Sporo metoda krioprezervacije, izvodi u fazama, najčešći način zamrzavanja ljudskih embrija. Sa sporim hlađenje, se odvija korak po korak dehidracije ćeliju, koja pomaže da se smanji rizik od velikih unutarćelijskih kristala leda.

Zbog osmotski gradijent cryoprotectants "izvukao" iz vode ćelija, koji zamrzava u međućelijski prostoru. Sa strane prilaženje (sjetve) koristi se za sprečavanje spontanog stvaranja leda. Pincete dodirivati ​​slame koji sadrži rješenje za ćelije na temperaturi od -6,5 ° C, a zatim izlaganje desetak minuta na temperaturi kristalizacije.

Stoga, na temperaturi od -35 ° C embriji su postavljeni u tečnim azotom, gdje je posljednji korak zamrzavanje i pri čemu embriona može se čuvati do upotrebe.

Međutim, rizik od oštećenja zbog embriona inter- i intracelularne kristalizacija je dovoljno velik. Osim toga, spori način krioprezervacije se obavlja sa specijalnom opremom, koji košta visok.

Metode za pripremu zamrznutih embrija za IVF

ultra metode krioprezervacije su sljedeći. Embrioni koji su bili u dimethylsulfoxide i saharoze rješenje se prenosi u tečnim azotom fini kristali leda formiraju se naknadno, topi na nižim temperaturama.

Način vitrifikacija (lat VITRUM -. Staklo) je pretvoriti u tečnost SSD proces rezultira ekstremno povećanje viskoznosti u ćelijama hlađenja, a ne kristalizirati, i.e. Vitrifikacija - zamrzavanje bez formiranja kristala leda. U vitrifikacija, ne samo da se proces hlađenja je znatno pojednostavljen, ali rizik nestaje hemijske i fizičke štete uzrokovane inter i intracelularne kristalizacije.

Ova metoda se izvodi pomoću vitrifikacija tečnost, koja se sastoji od dvije vrste cryoprotectants:

Video: IVF korak po korak. zamrzavanja embrija

• rješenje s visokom koncentracijom cryoprotectant koji može prodrijeti stanične membrane (propilenglyukol, glicerol, etilen glikol);
• malopronikayuschego cryoprotectant rješenje za dehidraciju ćelija (polietilenglyukol, Ficoll, saharoza).

cryoprotectant koncentracija je tako visok da se previše brzo hlađenje do -196 ° C viskoznost tekućine je znatno povećan.

Važno je da je za ostakljivanje, za razliku od spora krioprezervacije, koriste isti rješenja, bez obzira na fazu razvoja jajnih ćelija ili embriona. Praktično proces vitrifikacija je postavljanje jajnih ćelija ili embriona za ostakljivanje okolinu, ali za vrlo kratko vrijeme kako bi se izbjegle toksične efekte zbog daljeg ultra smrzavanja.

Prema tome, metoda vitrifikacija ne zahtijeva značajne troškove logistike, te je pogodan za praktičnu upotrebu. Kada hlađenje se znatno pojednostavljuje proces vitrifikacija, koji sprečava razvoj fizičkih i kemijskih oštećenja ćelija zbog formiranja inter i intracelularne kristala.

Video: Samo o IVF: Zamrzavanje. Kome to treba? bankarstvo oocita

Kao zaključak, željeli bismo reći da je vitrifikacijom in vitro oplodnje može se smatrati kao alternativa usporiti zamrzavanje protokol. Nadamo se da će u bliskoj budućnosti će biti jasno dokazano prednost u odnosu na spore zamrzavanje vitrifikacija.